制片小贴士
不要让样本干燥或者凝固:如果在制片之前样本已经凝固或者干燥,细胞很可能不能充分展开且难以判读。而且,细胞经常会被扭曲,或者由于相互凝固在一起无法染好。在采用之前应将几个干净玻片放在容易拿到的位置,缩短采样和制片间隔时间。
一个经常会犯的错误是将针头里的样本远距离喷洒在玻片上。这会导致在玻片上形成许多滴样本,非常像散弹发射(图1-20),带来的问题是这些小点在操作者还没来得及制片时就已经干燥了。当在显微镜下观看时,会发现一团团没有平展开来的细胞,难以看清细胞形态。当将样本移至玻片上时,针头边缘应尽可能近的靠近玻片,推出样本呈一滴。然后应立即用前面介绍的一种制片方法制作玻片。如果采集到足够多的样本,滴在多个玻片上,应在样本干燥之前快速将所有玻片制作完成。如果使用不抽吸法时,针筒预先吸入空气可以减少采样和制片时间,并且制片之前样本凝固的可能性。 避免制作厚抹样:制片抹样太厚的话,细胞无法完全展开,影响判读。被过多血液污染的样本,或者从易脱落大量细胞的组织中采集的样本(例如淋巴结抽吸物),常导致抹样过厚。理想情况是只滴一小滴样本到玻片上(大约制作血涂片所需的血量)。如果滴过多的样本到一个玻片上,那么抹样通常会很厚。如果样本一直可以滑到玻片边缘,抹样也很可能会过厚。 一般来说,用针筒推出到玻片上的样本量是可以控制的。但是如果太多样本滴到玻片上,利用血涂片法仍然可以得到很薄的抹样。展片向后滑动至刚刚触及样本,样本便会由于毛细管作用在展片上铺开,然后快速向前抹片。另一种方法是,像玻片盖玻片法一样将展片平放在样本上,然后拿起展片并放在另一个干净的玻片上,在它上面制作一个抹样。如果需要的话,这种方法可以重复多次,最终初始样片上的样本也已经被涂抹开来。利用这种方法可以从一大滴样本中获得多个薄薄的抹样。
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