化验技术

胡璠

耳镜

使用耳镜对于许多动物来说，可以显示听觉刺激、炎症、浅表或深度的瘙痒。为了进行彻底的检查，对于那些疼痛或不配合的动物来说镇静或常规的麻醉也许是必要的。耳镜检查的目的是：

●       检查耳螨

●       排除外耳炎的其他原因，如外来异物或组织

●       评估外耳道的环境

●       检查鼓膜的完整性

●       取得样品做细胞学检查或取临近的外耳道样本做培养如果有必要则进行鼓膜切开后取中耳道样品做培养

好的手持耳镜能给予充足清楚的图像，但是耳道内窥镜的出现提供了若干优点包括储存数码图片的功能、对外耳道深处和中耳更清晰的成像并且可以在清晰图像的引导下通过耳镜顶部旁的工具引入通道进行抽吸和/或组织取样。

Wood’s灯

这个灯发出淡紫色的光和紫外线，被用来识别荧光部位的癣菌感染。灯使用前必须充分预热（至少5分钟）并且在暗室中进行。检查被毛，小分生孢子感染部位有标志性的绿色荧光。这项技术用于选择有感染小分生孢子的毛发去做培养来确诊疾病。不幸的是，不是所有小孢子属的菌株都会有荧光反应，阳性反应预计接近50%。有时，受感染的毛发需要在伍德氏灯下变暖才能显现出荧光反应，这也许就是检查出现假阴性的一个原因。其他少数可引起荧光反应的真菌有：M.distortum、M.audouinii、M.equinum和Trichophyton schoenleinii。荧光反应出现假阳性原因可能是某种局部用药、皮屑或细菌。请注意，若想诊断皮肤癣菌病，荧光反应应该出现在被毛上而不是皮肤或鳞屑上。

被毛梳理：

样品采集：

用跳蚤梳或硬塑料梳子梳理被毛以便收集表面的碎屑进行化验。碎屑应被收集到有盖的培养皿中做显微镜或手持透镜镜检。

湿纸检查：

将梳理下的碎屑放在潮湿的白纸上来检查有无跳蚤粪便。黑色的跳蚤粪便会将湿纸染红，因为有可溶的血色素。

Mackenzie牙刷技术：

这是一个筛查无症状但有真菌感染的猫和评估经过治疗感染是否被清除的方法。用新的或无菌的牙刷梳理所有被毛，然后接种到真菌培养基中。

直接镜检的样品：

毛发采集：

拔毛放于干净的透明胶带上并贴在载玻片上或滴上石蜡油放在盖玻片下。检查毛尖有无断裂或受损的迹象，有无突然、生硬或磨损的末端而不是逐渐变细的正常毛尖。这些损伤表示动物有啃咬或过度舔舐，病态毛干也发生在皮肤癣菌病。检查毛根评估毛发是处于生长期（有球状毛根）还是终止期（倒钩状或受损的棒状毛根）。生长期和终止期毛发的数量可以评估出目前主级毛发和次级毛发的数量。在被毛的天生缺陷疾病、发育不良和基因缺陷病例中会发现毛发结构的异常。也可能检出黑头粉刺和毛囊管型，既拔出的毛根有包裹物。

拔毛化验可检出蠕形螨，尤其是在脚趾和眼周皮肤拔毛化验的检出率比刮片高。当同时怀疑有癣菌的感染时，拔毛还可以做镜检和真菌培养。

透明胶带法：

用透明胶带在皮肤表面取样很实用，取样后粘在载玻片上镜检外寄生虫和虫卵。此法非常适用于小型哺乳动物难以刮片取样的部位。在剪过毛的皮肤表面采样还可以染色（Diff-Quick或Gram）镜检寻找微生物如马拉色菌。

毛囊挤出物的涂片：

这是从毛囊中收集蠕形螨很有效的一种方法。挤压皮肤将挤出物涂在干净的载玻片上染色镜检。还可以将挤出物收集到解剖刀上，再转移到载玻片上。不染色，滴少许矿物油（或液体石蜡）再盖上盖玻片。

耳蜡或耳分泌物的涂片：

外耳道的碎屑通常用棉签收集然后涂到载玻片上。耳螨及其虫卵可以通过显微镜观察发现。用液体石蜡湿润棉签可以帮助分泌物粘附在上面，还可以将其滴在载玻片上使样本与棉签分离，再盖上盖玻片。

皮肤刮片：

皮肤刮片主要运用于诊断蠕形螨（深刮）和疥螨（大范围浅刮）。对于蠕形螨病例，应从黑头粉刺处取样。对于疥螨病例，应取主要病变部位和没有溃疡的部位。多处取样是必要的。病变边缘的丘疹或结痂是最好的取样部位。剪掉被毛用钝的解剖刀收集样本。

癣菌：

如果怀疑癣菌病，我们应该从一个较新的损伤边缘取样，包括拔毛和皮肤刮片。癣菌元素在氢氧化钾溶液中最好发现；在石蜡油中可发现由于真菌感染导致的毛发变得不透明和结构缺失。可以在断裂的毛干中和鳞屑里发现菌丝。孢子可能在毛内（毛内癣菌孢子）或更多的是在毛干（毛外癣菌孢子）。滴一滴蓝黑墨水或乳酸酚棉蓝在载玻片上，癣菌的结构可以看的更清楚。

脓疱或皮肤损伤的染色样本：

镜检脓疱、水泡的内容物以及病灶表皮脱落的细胞进行细胞学检查，可以鉴别炎性反应、棘层松懈细胞、肿瘤细胞和微生物。理论上，未破的脓疱应该用无菌注射器刺破，吸取内容物涂在载玻片上染色。还可以从溃疡病灶或单独病灶的切面压片。小心操作避免污染着色剂，因为尤其是酵母菌可存留在染色剂中并出现在下一个染色样本上。为避免发生，需充分加热混合分泌物样本。用胶带粘取皮屑，滴一滴染色剂在胶带下方，放置10-20分钟，冲洗并用纸巾吸干水分进行镜检。其他染色剂还有姬姆萨和亚甲基蓝。革兰氏染色能更好的观察微生物。

Rondo

xuxinwei916

15877442700

生长期和终止期毛发的数量可以评估出目前主级毛发和次级毛发的数量。

老师，这些数量的多钱能说明什么问题呢？

木子如

感谢分享

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