皮肤和皮下组织细胞学（一）

佘源武

皮肤和皮下组织细胞学

福州乐馨宠物医院 游少宝翻译

广州百思动物医院 佘源武校正

1.介绍

从伴侣动物皮肤和皮下组织病变进行细针抽吸(FNAs)是收集细胞学样本最常用的方法。这可能是由于病变明显可见或可触摸到, 所以这些病变容易被主人在日常身体检查时观察和注意到。病变所处的位置使得它们容易进行抽吸或穿刺，而不需要侵入性的操作。皮肤和皮下病变的细胞学检查往往能够对疾病的潜在发病机制进行快速，准确的分析。在一项研究中，犬猫的皮肤和皮下肿块细胞学样本中，有 83.2%（243 / 292）的病例具有诊断性(Ghisleni et al., 2006)。他们比较了细胞学和组织学诊断，并且使用组织学作为黄金标准；发现细胞学的敏感性和特异性均非常好（分别为97.9%和89.3%），阳性预测值很好（ 99.4%）。阴性预测值偏低(68.7%)。正如所预期的，使用该技术取得的少量样本，无法完整的代表整个病变。本研究表明,细胞学对于大多数皮肤和皮下组织病变的局限性很小。事实上,准确的细胞学信息往往能够引导诊断和治疗。

2.皮肤结构

皮肤是人体最大的器官，是全身性感染和损伤极其重要的屏障。它在水和电解质平衡，温度调节，产生维生素D3中起着关键作用，并且是一个灵敏的感觉器官。它由表皮，真皮和皮下组织组成。特定区域的皮肤会出现特化，可能或不含有毛囊和腺体。血管，神经和淋巴结构与皮肤所有结构密切相关。

2.1 表皮和附属结构

皮肤最外层由表皮细胞构成,从胚胎外胚层发育。表皮的大部分细胞为复层鳞状上皮细胞，单层柱状上皮细胞形成分泌导管和腺体。表皮的不同分层来源于表皮的基底细胞层(图4.1). 基底细胞和表皮干细胞存在于表皮最深层的基底层中。它们附着在位于真皮层交界处的基底膜上。基底细胞较小的立方细胞，具有非常明显的细胞连接以及一个小而圆的细胞核。当基底细胞向表皮的最表层移动时，它们变平并形成棘层细胞。这些细胞继续向表面迁移。在颗粒层中，细胞彼此层叠并开始产生透明角质颗粒。细胞核开始缩小而变得致密。在皮肤的某些特定区域（鼻子，足垫，乳头），下一层皮肤（透明层）包含足够的细胞层，可以在组织学上可视化。透明层细胞为淡染的扁平细胞，通常不含有细胞核。最表层的细胞形成角质层，由死亡的角质化鳞状上皮细胞组成，随着皮肤再生而最终脱落。这些细胞通是多边形的，含有丰富的角质化细胞质以及致密的细胞核，或者不含有细胞核。在细胞学中，细胞中的角蛋白是浅蓝-绿色，并且当用罗曼诺夫斯基型染色剂进行染色时可以观察玻璃状外观。在表皮的大多数区域中，表面上皮细胞角化不含有细胞核。在细胞学样本中，这些细胞被称为角质鳞片或角质化碎片 (图4.2 A，B).

图4.1： 皮肤组织病理学。15岁的国内长毛猫，皮肤部分。图片底部苍白的细胞构成真皮层。基底上皮细胞略高于真皮层，是嗜酸性细胞的第一层，含有较大的圆形细胞核。嗜酸性细胞中细胞核的下一层与棘层相关。颗粒层是具有淡染的核或无核的细胞层。颗粒层的某些细胞位于表皮角化细胞的下层，可能含有嗜碱性颗粒。角质层是位于图片顶部亮粉色、片状的角化物质。 (H＆E，1,000×放大倍率)

图4.2 A, B. 皮肤表面的角质形成细胞，是有角或多边形的较大细胞， 瑞吉氏染液着染后可能不尽相同。细胞可能是水蓝色至亮蓝色（A，200×放大倍数）或嗜酸性着染至紫色（B，500×放大倍数）。重要的是，浅表角质形成细胞不含有细胞核。

2.2真皮

真皮由间质细胞和胶原纤维组成，从胚胎中胚层分化而来。真皮内有两个区域： 接近表皮基底层的乳头层，以及含有更致密胶原组织的网状层。

2.3皮下组织结构

像真皮一样，真皮层下的组织起源于胚胎中胚层，由间质细胞和原纤维组成。皮下组织连接着真皮层和下方的组织。在皮肤的许多区域中，皮下组织内大量脂肪细胞，包裹形成皮肤的脂膜层。

2.4腺体结构

2.4.1唾液腺

参见第11章（口腔），深入讨论唾液腺细胞学。

2.4.2乳腺

正常乳腺组织的抽吸通常含有血液，只有少量或没有乳腺细胞。乳腺细胞（如果存在）可能包括分泌细胞（大小均一的细胞，含有圆形的细胞核和嗜碱性细胞质。细胞成簇或呈腺管排列， 图4.3, 4.4), 管状细胞（基部细胞，卵圆形细胞核和少量细胞质，有时可见成片存在），以及肌上皮细胞(Allison, 2014)。肌上皮细胞起源于与腺上皮细胞相同的干细胞，但表现为纺锤形至星形细胞(Gudjonsson,2005; 图4.5)

图4.3 15岁雌性波美拉尼亚犬，乳房肿物中成簇存在的上皮细胞和嗜碱性分泌物质。 这些上皮细胞大小相对均一，并只表现出少量恶性肿瘤的标准，提示良性上皮肿瘤。 （ 瑞吉氏染色，比例尺=100μm）

图4.4. 更高的放大倍数视野，与Figure 4.3相同, 表现相对均一的上皮细胞群落，泡沫细胞和嗜碱分泌物。还存在几个嗜中性粒细胞，提示病灶内炎症的存在。 (瑞吉氏染色，比例尺=10μm)

Figure 4.5.乳腺肿物FNA中的梭形细胞（和血细胞），来自10岁绝育雌性可卡犬。这些细胞和肌上皮细胞一致，但可能是混合乳腺肿瘤中的一部分；也可能是间质肿瘤，如纤维肉瘤。(瑞吉氏染色, 比例尺 = 10 µm)

细胞学样本可能含有乳腺分泌物，通常细胞数量较少并且可以含有脂质或蛋白质分泌物质。 乳腺分泌物质可能在肿瘤性或非肿瘤性病变中发现，并且通常表现为成块存在的、平滑的嗜碱性物质(图 3, 4).泡沫样细胞可能在乳腺组织、乳腺分泌物中发现。这些圆形的细胞类似于巨噬细胞(图6). 它们通常可见大量空泡化的细胞质，并且还可能含有嗜碱性分泌物质。 在人类中免疫组化染色显示，乳腺泡细胞可以是上皮细胞或是组织细胞的起源 (Damiani et al.,1998). 在乳腺分泌物中也可以发现少量的巨噬细胞和嗜中性粒细胞。

图4.6 来自犬乳房肿物中的泡沫细胞。这些细胞通常存在于乳腺与乳腺肿块中，表现类似于巨噬细胞。 (瑞吉氏染色，比例尺= 10 µm)

2.4.3 管状腺

管状腺可以分为局质分泌腺和顶浆分泌腺。局质分泌腺存在于犬足垫中。顶浆分泌腺是家畜中主要的汗腺类型。存在于犬猫的肛囊中。顶浆分泌腺由角化鳞状上皮细胞排列而成; 然而，这些细胞在细胞学上具有神经内分泌表现（见顶浆分泌腺肿瘤）。

2.4.4 皮脂腺

皮脂腺是与毛囊相关的泡状腺。它们也是猫肛囊腺的组成部分。这些腺体产生皮脂，其作为微生物的屏障，防止水分流失，并保持毛发健康。

3.皮肤和皮下组织病变的细胞学表现

皮肤或皮下肿块穿刺胞学表现可分为：无细胞样本，细胞碎片样本，血液稀释样本，炎症样本和组织样本（可能是正常或肿瘤）。如果样本不含有细胞，则应考虑囊肿的可能性 (图4.7).

更常见的是，无细胞的样本表明抽吸不足，建议重复抽吸或活检进行病理组织学检查。细胞碎片可能存在因为细胞在收集过程中受损，或由于病变中存在坏死。这些样品通常是无诊断性的， 因为无法充分评估细胞形态学。在这些情况下，不同区域的重复抽吸可能是对判读有帮助。

如果样本中含有完整细胞，则需要将细胞分类为外周血细胞，炎性细胞，或与病灶有关的组织细胞。当有大量红细胞与少量的白细胞出现，并且罕见组织细胞时，识别潜在的病理过程是具有挑战性的。正确的采样之后，如果样本含有大量的红细胞，出现噬红细胞现象/或含铁硫黄素的巨噬细胞，可以做出出血的诊断(图4.8). 血小板在急性或慢性出血性病变是观察不到的，但可能在超急性出血中观察到。在缺乏这些特征并且含有血小板的样品中，分析外周血涂片和血液稀释的细胞学样品，确定是否存在炎症。如果组织抽吸物中的白细胞密度高于外周血有核细胞计数，应怀疑炎症。在第2章中讨论的炎症过程（一般性炎症的原则）适用于皮肤和皮下组织的病变。这些炎症病变的常见原因在本章后面部分中扩展。如果存在非炎症细胞，则基于细胞形态确定细胞的组织类型来源。大多数非炎性细胞类型可分为上皮细胞，间质细胞和圆形细胞。

Figure 4.7. 10岁的美国短毛猫，皮肤肿块的囊性积液。载玻片背景中有一层较薄的蛋白质物质。不存在有核细胞，可见一些红细胞。（瑞吉氏染色，500×放大率）

图4.8. 犬出血性皮下肿块FNA，可见含铁血黄素沉积的巨噬细胞。巨噬细胞包含一个明显的红细胞和几个大小不一，圆形，黑色素结构，提示含铁血黄素。（瑞吉氏染色，1,000×放大率）

上皮细胞通常是圆形或多边形，有明显的细胞边界和圆形细胞核。他们通常呈片状排列，可见明显的细胞连接 (Figure 4.9). 细胞连接是存在相邻细胞间明显的粉红色线状结构。 间质细胞为纺锤形，含有卵圆形细胞核和束状的细胞质边缘，通常在载玻片上单个存在，也可能聚集在一起(Figure4.10). 间质细胞群落缺乏细胞与细胞连接，出现互相缠绕而不是彼此相邻排列。 有时候间充质细胞群落难以与上皮细胞区分开， 这可能会妨碍通过细胞学鉴别肿瘤类型。在这些情况下，临床表现，特殊染色和活组织检查与组织病理学可以帮助确诊(Andreasen et al., 1988; Hoinghaus et al., 2008). 圆形细胞单个存在，含有圆形细胞质和圆形细胞核。 五种圆形细胞肿瘤及其独特的细胞学表现将在本章后面介绍

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老师有细胞学的群可以学习吗

刘秋茹

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金桥

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王帆

想看皮肤和皮下组织细胞学（二）