贾第鞭毛虫

佘源武

佘源武 汤永豪翻译校对 广州百思动物医院

病原体和流行病学

贾第鞭毛虫，是鞭毛虫类中的一种原虫，很多年前就已在动物和人类的粪便中被发现。贾第鞭毛虫存在两种形态，即滋养体（Trophozoite）和包囊（Cyst）。 滋养体是有活性的， 运动的形态，长约15μm，宽约8μm，呈泪滴状并且腹部带有吸盘。 滋养体几乎无法在正常的粪便中发现，对许多环境因素敏感，因此滋养体通常无法在动物之间的传播。包囊长约12μm，宽约7μm，对环境耐受，因此传播中发挥主要作用。包囊含有两个不完全分离但已成型的滋养体，包含鞭毛轴丝，腹部吸盘以及多达四个细胞核。在宿主体外潮湿和寒冷的环境中，囊孢可以存活数个月，但是对干热的环境很敏感。

贾第鞭毛虫通过直接摄入粪便中的包囊或间接摄入污染的水、食物、贮存宿主、感染的猎物或者污染物而感染。猫的潜伏期（从摄入包囊到粪便中出现包囊）为5到16天（平均为10天），犬的潜伏期为4到12天（平均为8天）。感染后2-7天，猫的包囊脱落数量不定，有些无法察觉，有些每克粪便可能含有超过100万个包囊。年轻的犬每克粪便中平均含有2000 个脱落的包囊；在所有感染的犬中（不分年龄），每克粪便中平均含有706个脱落的包囊。大部分感染时是自限性的，在感染后27到35天时包囊停止脱落。但是某些感染的动物可能脱落包囊长达几个月。

贾第鞭毛虫存在许多种类，蓝氏贾第鞭毛虫（G. duodenalis，与肠贾第鞭毛虫（G. intestinalis） 或兰伯氏贾第虫（G. lamblia）同义)是一种可以感染人类和犬猫的贾第鞭毛虫。根据遗传分析，在蓝氏贾第鞭毛虫中就有至少7种不同的集聚体（A至G）。集聚体A在感染的人类、犬、猫和其他哺乳类动物的粪便中扩增出来。集聚体B最常从人的粪便中扩增出来，偶尔出现在犬的粪便中。总的来说，大部分犬是种属特异性的集聚体C和D感染，猫是集聚体 F感染。有人提议将这些集聚体重新归类，单独作为贾第鞭毛虫的种类，但是这个提议还没被统一接受。

犬猫贾第鞭毛虫感染在世界很多流行病学研究，病例报告和治疗性研究中均有报道。分析出的感染率不见相同，出现或者不出现腹泻。通常而言，犬猫的感染率约为5%—20%。因为很高概率会出现亚临床感染，因此在大部分研究中，没有表现出粪便中贾第鞭毛虫的出现与临床症状的相关性。年轻或免疫抑制的动物，以及生活在拥挤环境中的动物出现相关临床症状的风险最高。

临床症状

症状和病原体

易感宿主摄入贾第鞭毛虫的包囊后，流入十二指肠的胃酸和胰酶，刺激双滋养体的释放，之后滋养体迅速成熟，通过腹部吸盘和大量的寄生表面分子，包括Giardins（α,β,δ和γGiardins）和收缩蛋白网状结构附着于绒毛上皮的刷状缘。 滋养体见于犬的十二指肠和回肠， 在猫中主要存在于空肠和回肠。滋养体通过二分裂增殖，然后以不明的机制形成包囊。贾第鞭毛虫包囊的污染物，包括节肢动物、动物的被毛、食物以及水源，是传播的重要方式，包囊可以在寒冷和潮湿的环境存活数天到数周。

虽然贾第鞭毛虫的发病机理未完全明了，但是离体和活体实验表明存在多方面因素，包括肠吸收不良和过度分泌，是造成腹泻的主要机制。宿主和寄生虫的相互作用会导致凋亡级联的基因上调以及活性氧的形成。细胞凋亡的诱导增加胃肠的渗透性，腔内抗原活化宿主免疫介导的病理通路。贾第鞭毛虫也会改变上皮封闭蛋白，这是上皮紧密连接的组成部分。贾第鞭毛虫可导致绒毛萎缩的缺乏或者其他粘膜损伤的临床症状。贾第鞭毛虫感染刺激氯化物的分泌，降低二糖酶的活性。轻度到中度的上皮内淋巴细胞浸润，可能与钠和葡萄糖吸收障碍有关。上皮屏障功能的丢失可能导致慢性肠道疾病病，但是其机理仍然不明。肥大细胞增生可能导致上皮屏障功能的丢失。至今仍然未知，为何某些人和动物出现长期亚临床症状的感染，这可能是宿主和寄生虫的因素相关。

虽然大部分犬猫脱落包囊时没有表现出临床症状，但贾第鞭毛虫的感染仍可能导致某些动物疾病的发生。感染贾第鞭毛虫的主要症状包括慢性腹泻和体重减轻。粪便通常是粘液性、苍白和柔软，带有强烈的气味，也可能出现脂肪痢。通常不会出现粪便带血，除非同时感染其他的病原，如钩虫、等孢球虫、三毛滴虫或者产气荚膜梭菌。感染贾第鞭毛虫的犬猫几乎不会出现发热和呕吐的症状。混合感染其他病原，如隐孢子虫或者三毛滴虫会加重犬猫的腹泻症状。目前为止仍然未知对于犬猫而言，是否不同的贾第鞭毛虫会导致不同的临床症状或者是否发现的集聚体中一些集聚体会比其他集聚体的致病性更强。

诊断

实验室异常

单纯的贾第鞭毛虫感染很少见血常规和血液生化结果的异常。

影像诊断

腹部放射影像结果异常不常见以及没有特异性，当出现异常时提示弥散性肠炎。

微生物检测

因为贾第鞭毛虫包囊很小并且亚临床感染率高，对贾第鞭毛虫感染容易出现误诊，诊断不足和诊断过度。酵母菌很容易被误认为贾第鞭毛虫，从而导致粪便漂浮法的假阳性结果。贾第鞭毛虫包囊间歇性脱落，所以为了检查出包囊，重复的粪便检查是十分必要的。此外，在粪便漂浮的液体中，囊孢可能退化导致假阴性结果。图2评估了各种类型的贾第鞭毛虫检测方法。但没有一个检测方法只对单份粪便样本检测有100%的敏感度。接下来讨论的就是现有的诊断方法。

1.细胞学检测

通过湿片镜检，可用于评价粪便中是否存在贾第鞭毛虫的滋养体。在载玻片上加入大概2mm×2mm的新鲜腹泻的粪便或者粘液，滴一滴生理盐水（加热到体温），混匀并盖上盖玻片。 在100 倍镜下，可见滋养体“落叶式飘落”移动。在400倍镜下，观察结构的特征。由于滋养体与黏液混合，所以唯一可以看到的是运动的鞭毛。即使由于大小相近，贾第鞭毛虫和三毛滴虫容易混淆，但是基于他们的运动方式和形态学特征还是可以区分出来。与贾第鞭毛虫不同的是，三毛滴虫含有波动膜和旋转的运动方式，缺乏内凹的表面以及仅含一个细胞核。 如果细胞学检测无法确定，进一步检测粪便中贾第鞭毛虫抗原、PCR 检测贾第鞭毛虫的 DNA、粪便培养或者 PCR 检测三毛滴虫可以用于区分二者。一旦在直接抹片或者湿片镜检中发现运动的贾第鞭毛虫，则需要对新鲜的粪便染色进行细胞学检测。用复方碘溶液、 亚甲蓝或者甲基酸绿对湿片进行染色，有助于观察滋养体的内部结构。滋养体很少见于硬的粪便。

2.浓集技术

使用浓集技术更容易检测到贾第鞭毛虫的包囊。常用 Sheather’s 糖离心分离和硫酸锌离心分离。除了鉴别贾第鞭毛虫囊孢，其他常见的寄生虫虫卵。由于贾第鞭毛虫的包囊与酵母菌大小相似，二者容易相混淆，但是贾第鞭毛虫囊孢有其独特的结构。因为包囊间歇性脱落，因此在排除贾第鞭毛虫感染引起的腹泻前，至少检测三次粪便样本，每次间隔约为一周。如果粪便样本无法立即检测，可以保存在4℃的环境数天，但样本不能冷冻。

3.十二指肠采样

使用内窥镜对十二指肠分泌物进行取样，然后检测沉渣中的滋养体，一度被认为是检测犬贾第鞭毛虫最敏感的技术，但是随着免疫学和分子学技术的到来，十二指肠取样经不再使用。在猫中，贾第鞭毛虫处于小肠的中段到远端，所以这项技术不大可能获得阳性的结果。

4.直接免疫荧光

单克隆抗体免疫荧光抗体（IFA，Immunofuorescent antibody）检测(Merifluor Cryptosporidium/Giardia, Meridian Diagnostics, Cincinnati, OH)一般用于检测人粪便中的贾第鞭毛虫包囊和隐孢子虫卵囊，现在在多篇研究中已用于检测犬的粪便。贾第鞭毛虫集聚体C、D和F可以用IFA检测出来，但是这个方法未用基因型样本进行严格评估。IFA用免疫学确认（荧光性）和形态学评估（大小和形态）来确定粪便中贾第鞭毛虫的存在。一项研究表明，检测犬舍的狗粪便，IFA比硫酸锌漂浮法的敏感性和特异性更高，而与抗原检测相差无几。隐孢子虫感染也会引起小肠性腹泻，可能与贾第鞭毛虫混合感染，并且很难用其他技术检测出来，临床医生常用IFA检测。IFA抹片需要用荧光显微镜观察，因此，这个检测方法只用于实验室诊断。如果样本不能立刻进行检测，可以保存在4℃数天，但不可以冷冻。

5.酶联免疫吸附试验检测粪便中的抗原

几种ELISAs用于检测人类粪便的贾第鞭毛虫。兽医也有相关的方法（SNAP Giardia, IDEXX Laboratories, Portland,ME）检测犬猫的粪便。通过与其他检测技术比较，一些贾第鞭毛虫抗原检测，其检查结果与ELISAs检测结果不一致。一项关于猫的研究表明，SNAP贾第鞭毛虫抗原检测与粪便漂浮法有相似的敏感性和特异性。当这两种检测方法结合起来时，其结果的总体敏感性高达97.8%。很少资料表明现有的粪便抗原检测方法可以鉴别贾第鞭毛虫的集聚体C、D和F（比如犬猫相关的集聚体）。在一篇研究中，分离出4个集聚体C和13个集聚体D，使用SNPA贾第鞭毛虫抗原检测方法结果均为阳性。伴侣动物寄生虫委员会最近建议，在评估腹泻的犬猫中使用粪便抗原检测作为粪便漂浮法的补充，而在健康动物则不需要，因为健康动物的抗体阳性和囊孢阴性对临床和人畜共患的影响是未知的。而且腹泻消失后，贾第鞭毛虫抗原阳性会维持多长时间。因此，兽医师如果需要检测犬猫的贾第鞭毛虫治疗是否成功，只建议使用粪便漂浮法作为后续的评估。

6.使用进行聚合酶链反应分子学诊断

贾第鞭毛虫属的DNA 可以使用PCR从粪便中扩增出来。通过PCR产物的序列分析，可用于确定贾第鞭毛虫的集聚体。然而扩增结果取决于目标序列的扩增，因此使用PCR分离特定的蓝氏贾第鞭毛虫集聚体时并不总能得到一致的结果。因此如果使用一种目标基因进行检测，某些犬猫中分离出来的基因型可能被作为“潜在的人畜共患性”，但如果使用另外的基因型则被作为“宿主特异性”。因此现在建议，如果集聚体已经确定，则需要评估三个基因（用PCR和测序评估多个基因，也就是多位点序列分型）。如果粪便中有PCR抑制因子，贾第鞭毛虫PCR检测也会出现假阴性，因此PCR不能单独用于检测贾第鞭毛虫。

病理学发现

贾第鞭毛虫感染可能会导致小肠轻度增厚。因为病原不是肠侵入性的，肠腔内通常不会出血，除非存在混合感染。有慢性临床症状的动物可能会消瘦。也有可能存在其他寄生虫，如蛔虫和钩虫。

组织病理学发现

在临床上，贾第鞭毛虫感染动物的小肠进行组织病理学检查，可发现刷状缘微绒毛长度的弥漫性缺失。也可能出现上皮内淋巴细胞增多，肥大细胞增生。然而犬，猫和人感染贾第鞭毛虫后，肠道活检结果也可能是正常的。

治疗与预后

贾第鞭毛虫存在特殊的耐药机制，所以目前无法预测哪种抗贾第鞭毛虫的药物对犬猫个体有效。由于犬猫的贾第鞭毛虫实验室很难进行培养，所以只有很少体外药敏实验结果。即使已经有各种各样的药物用于治疗犬猫的贾第鞭毛虫，但是少有研究在实验感染动物上评估这些药物的有效性和不同剂量。在大部分研究中，只评估治疗后短期内的粪便样本，并没有诱导病患产生免疫抑制，再去评估感染已经清除或者只是受抑制。感染贾第鞭毛虫不会产生终生免疫，可能发生再次感染，这种情况也会阻碍对于治疗评估的研究。目前可用于确诊或者怀疑感染贾第鞭毛虫犬猫的经验性药物包括阿苯达唑, 非班太尔/噻嘧啶/吡喹酮, 芬苯达唑,呋喃唑酮, 异丙硝唑,甲硝唑, 阿的平和替硝唑。正在研制中的新药和信息较少药物包括：阿奇霉素, 硝唑尼特,巴龙霉素和塞克硝唑。

如果怀疑混合感染梭杆属，建议使用甲硝唑。在猫中，苯酰甲硝唑会比甲硝唑更好，大多数猫容易耐受。由于甲硝唑存在神经毒性的风险，因此不能口连续口服超过7天或者每日总剂量不能超过50mg/kg。异丙硝唑、罗硝唑、塞克硝唑、替硝唑是甲硝唑同类的药物，已经被用于治疗犬猫的贾第鞭毛虫。如果临床上大量的犬受感染，可考虑把异丙硝唑加入饮水中。罗硝唑被用于卫生管理来控制狗舍的贾第鞭毛虫感染，但是作者建议保留罗硝唑用于治疗胎儿三毛滴虫感染，因为潜在的神经毒性并且形成罗硝唑耐药的胎儿三毛滴虫。如果不能耐受甲硝唑，替硝唑是第二选择，但是其最佳剂量仍然未知。

如果怀疑混合感染线虫，阿苯达唑、非班太尔/噻嘧啶/吡喹酮或者芬苯达唑可能是最有效的抗贾第鞭毛虫药物。阿苯达唑会引起某些犬猫的骨髓抑制，因此有些兽医师会避免使用此药。在一些国家，非班太尔/噻嘧啶/吡喹酮批准用于犬猫的贾第鞭毛虫感染治疗，连续服用三天能够起效。已经在一些实验性感染猫中研究这些联合用药。实验模型所得数据表明，联合使用非班太尔和噻嘧啶呈协同作用。在治疗犬猫腹泻和贾第鞭毛虫感染时，目前很多临床医师选择芬苯达唑作为初始治疗，每天1次，连续5天，这样开销最低且安全范围较大。

如果首次用药没能清除感染（囊孢脱落）或者腹泻症状未消失，则可能出现耐药性，所以推荐用替代药物的另一种药。目前，一些临床医师推荐联合服用甲硝唑和芬苯达唑。其他的临床医师则只有当用单一疗法未能清除持续感染时，才会选择用联合疗法。

阿奇霉素曾经成功地治疗了一只犬的贾第鞭毛虫感染。巴龙霉素具有抗贾第鞭毛虫的作用，但是起会通过胃肠上皮吸收以及导致猫可逆性的急性肾衰竭。在某些国家，硝唑尼特是治疗人类的贾第鞭毛虫和隐孢子虫感染的标签用药，并且现在已经研究用于犬猫，但是治疗犬猫贾第鞭毛虫的最佳剂量仍然未知。此外，硝唑尼特常引起犬猫的呕吐。作者一般使用10mg/kg的硝唑尼特，每12h一次，混在食物中连续使用7天，治疗犬猫贾第鞭毛虫和隐孢子虫的混合感染。某些犬猫需要更长的治疗时间，所以如果初始治疗有反应，则需要继续治疗，而临床症状很少能够通过最初的7天治疗后消退。

在某些动物中，食物中增加纤维，能够减少细菌的过度增殖或者阻碍贾第鞭毛虫附着宇微绒毛，而有助于控制临床症状。限制脂肪的摄入也可能有效。在一项研究中发现，在小鼠感染贾第鞭毛虫之前使用屎肠球菌益生菌SF68（FortiFlora, Nestle Purina PetCare）能够减少包囊的脱落以及加强对贾第鞭毛虫的免疫应答。相反的，有慢性亚临床症状的犬，使用益生菌对囊孢的脱落没有明显的影响。另一项研究表明，收容所中急性腹泻的患犬同时使用甲硝唑和益生菌会比只使用甲硝唑有更快的反应，这些患犬大部分感染了贾第鞭毛虫。

药物治疗期间，对所有的犬进行洗澡可以减少再次感染的机率。犬猫的持续腹泻和贾第鞭毛虫感染，如果几种治疗方法都无法控制腹泻，预示着需要进行更加广泛的检查以诊断其他潜在的疾病。需要考虑的潜在疾病包括隐孢子虫感染、三毛滴虫感染（主要是猫）、炎性肠病、胃肠道淋巴瘤、细菌过度增殖、胰外分泌不足和免疫缺陷等。

贾第鞭毛虫治疗的主要目的是解决腹泻的临床症状。是否对粪便中存在贾第鞭毛虫囊孢的健康犬猫进行治疗仍然存在争议，因为疾病控制和预防中心通常不认为这些健康的宠物会对人类健康有明显的风险。治疗后，很可能再次复发或者不能完全清除，还有因为所有的药物都有副作用。例如在一个小型研究中，自然感染的患犬，大约50%的犬在治疗后产生副作用，而且当治疗后34天再次进行检测，超过60%治疗后的犬仍然存在贾第鞭毛虫感染。然而，由于贾第鞭毛虫引起的临床症状可能是间歇性的，某些贾第鞭毛虫是有动物间相互传染的危险（特别是免疫功能低下时），感染的健康动物是否进行治疗需要与宠主商量。如果临床医师和宠主决定治疗，对于表面上健康但粪便中检测出贾第鞭毛虫包囊的犬猫，大部分临床医师建议连续服用5天的芬苯达唑。治疗之后，如果动物健康并且包囊阴性，则不需要再次检测，直到下次定期的健康检查和粪便漂浮检查。感染贾第鞭毛虫的犬猫不需要对粪便中的抗原或者DNA进行检测，因为治疗后，阳性检测结果不知会持续多久。

如何管理正常粪便但贾第鞭毛虫抗原阳性且贾第鞭毛虫囊孢阴性的犬猫是一个常见的问题。这些动物可能是低级的感染，或者少部分的动物（大概2%-5%）出现了假阳性抗原结果。为了进一步评估包囊脱落，兽医师可以使用IFA进行检测或者增加两次额外的粪便漂浮检测（5天之内，三次离心漂浮阴性则可以排除动物和人类的贾第鞭毛虫感染）。如果这些方法的检测结果都是阴性，则抗原检测很有可能是假阳性。如果服用合适的抗贾第鞭毛虫药物两个星期后，仍然在粪便离心漂浮中观察到包囊，则需要考虑用其他类型的药物进行治疗。表面健康的动物建议治疗不要超过两个疗程。除非胃肠症状出现或例行粪便筛查（所有犬猫每年至少进行一到两次)，不然不需要再进一步诊断。

免疫和疫苗接种

宿主对贾第鞭毛虫不会产生消除性免疫，因此包囊可能反复脱落，临床症状和感染也可能再次发生。接种疫苗的犬猫也可能再次感染，所以之前的贾第鞭毛虫疫苗不再使用。

预防

防止感染贾第鞭毛虫感染的措施包括饮用环境中的水之前需要煮沸或者过滤，对有感染性的粪便污染物使用蒸汽清洁或季铵盐化合物（一分钟的接触时间）进行消毒。控制传播宿主，如果动物出现间歇性腹泻，则需要对环境中所有动物进行治疗和洗澡。感染动物的粪便需要从环境中迅速移除。

公共卫生

人类感染贾第鞭毛虫可能没有临床症状，或者导致急性或慢性的胃肠道疾病。急性贾第鞭毛虫感染的特征是水样腹泻，上腹疼痛、恶心、呕吐、食欲下降和体重减轻，这些症状出现在感染后6到15天。少年儿童和免疫缺陷的个体最有可能出现临床症状。慢性感染更有可能发生在免疫功能低下的个体中。最近的研究表明，功能性胃肠疾病例如肠易激综合征可能与先前感染过蓝氏鞭毛虫有关。

犬感染的贾第鞭毛虫集聚体（集聚体C和D）或猫感染的集聚体（集聚体F）通常与人的临床疾病无关，但曾在免疫功能不全的人粪便中检测出来。当与人类共处于一个环境（例如污染的水源）中时，在犬猫的粪便中可检测人类的贾第鞭毛虫集聚体A和B。然而，人类不太可能从犬猫粪便中的贾第鞭毛虫集聚体A或B得到新的感染。因此如果家庭成员都是健康的话，贾第鞭毛虫阳性的健康动物可能对人类的健康没有明显的风险。免疫缺陷的人可能有更高的风险，所以尽量减少其接触感染动物的粪便。

冷锋过境

感谢老师，全面又具体

胡璠

siping宝康

受教了！

曹金龙

yms251319

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刘明

hewen19861204

卢冬霞

虫虫长得好可爱

淡定