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标题: 血液学实验室检查(一)------血涂片制备及染色 [打印本页]

作者: 张伟伟    时间: 2018-10-30 10:10
标题: 血液学实验室检查(一)------血涂片制备及染色
血液学实验室检查(一)------血涂片制备及染色

1.    血涂片制备及染色
制备血涂片:血液在抗凝剂中放置时间过长会导致形态改变,抽完血之后需立即制备血涂片
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2.    染色:目前宠物医院常用的染色液包括瑞氏吉姆萨染色,Diff-Quik染色(迪夫快速染色),网织红细胞染色(新亚甲蓝染色)
(1)瑞氏-吉姆萨染色和Diff-Quik染色都属于罗曼诺夫斯基染色,在该种染色情况下,蛋白等嗜酸性物质会被染成红色,细胞核等嗜碱性物质会被染成蓝紫色。

两种染色方法比较:

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同一只犬血涂片瑞氏吉姆萨染色(A)及Diff-Quik染色(B)(100X,油镜),在瑞氏吉姆萨染色下多染性红细胞很容易被识别出来(箭头),Diff-Quik染色下不太容易识别出多染性红细胞。图片来源:联宠国际检测中心   
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同一病例不同染色方法:A, 犬肥大细胞瘤. (瑞氏染色, 600×.) B, 犬肥大细胞瘤(Diff-Quik染色600×)图片来源《Diagnostic Cytology and Hematology of the Dog and Cat》

2)新亚甲蓝染色(网织红细胞染色)
新亚甲蓝染色主要应用于一些贫血病例,通过新亚甲蓝染色,可以大概评估骨髓的再生反应情况。网织红细胞是一种幼稚的红细胞,胞浆里面有残存的RNA(在新亚甲蓝染色情况下会呈现蓝紫色的物质),是反应骨髓再生反应的重要指标。在新亚甲蓝染色情况下,与成熟的红细胞相比,网织红细胞中可见嗜碱性物质。

此外新亚甲蓝染色还可使海因茨小体着色更加突出,对于怀疑存在海因茨小体的病例,可以更好的评估。
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猫聚集型网织红细胞(长箭头)及点状网织红细胞(短箭头)(新亚甲蓝染色)(图片来源http://www.eclinpath.com/hematol ... ve-anemia-in-a-cat/
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犬网织红细胞(新亚甲蓝染色,100X,图片来源:联宠国际检测中心)

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犬海因茨小体(Diff-Quik染色,100X,图片来源:联宠国际检测中心)

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猫对乙酰氨基酚中毒,红细胞中可见大量海因茨小体(A:瑞氏吉姆萨染色;B新亚甲蓝染色,图片来源:http://www.eclinpath.com/hematology/morphologic-features/red-blood-cells/rbc-inclusions/heinz-body-hemolytic-anemia-in-cat-with-acetaminophen-toxicosis/)
建议:
1.      无论是进行血液学检查还是细胞学检查,至少一张玻片是用瑞士吉姆萨染色,这样可以更好的观察多染性红细胞,核仁等,也能排查肥大细胞。
2.      显微镜排查血液寄生虫的玻片可以用Diff-Quik进行染色,减少沉渣的干扰
3.      及时更换染液防止沉渣对观察造成的干扰
4.      怀疑存在微生物的涂片(如粪便涂片,脓性渗出物涂片)尽量避免浸染,以防污染染液,可采用滴染的方式。
备注:
罗曼诺夫斯基染色液是由伊红(酸性染料)和亚甲基蓝(碱性染料)组成,碱性物质(如血红蛋白)与伊红(酸性染料)结合被染成红色(常称为嗜酸性物质),酸性物质(如细胞核)与亚甲基蓝(碱性染料)结合被染成蓝色或紫色(常称为嗜碱性物质)。
网织红细胞染色液主要成分是新亚甲蓝

作者: 慧子2007    时间: 2018-10-30 11:35
谢谢老师分享,但是图片都打不呀,手机和电脑都打不开
作者: 这小子来了    时间: 2018-10-30 11:46
慧子2007 发表于 2018-10-30 11:35
谢谢老师分享,但是图片都打不呀,手机和电脑都打不开

现在可以正常看了
作者: 慧子2007    时间: 2018-10-30 11:54
可以看了,谢谢
作者: 张伟伟    时间: 2018-10-30 13:58
这回可以了,谢谢大家的支持
作者: 叮铛宠物    时间: 2018-10-30 18:13
感谢老师的无私分享
作者: BlackHeart    时间: 2018-10-30 19:08
谢谢张老师的分享
作者: lk0340530121    时间: 2018-10-30 21:05
谢谢张老师的无私分享
作者: lk0340530121    时间: 2018-10-30 21:06

作者: 静澜    时间: 2018-10-30 21:28

作者: Q飘雪    时间: 2018-10-30 22:19

作者: 戴柳    时间: 2018-10-31 10:57
又长知识了,谢谢老师
作者: 朱亮    时间: 2018-10-31 13:05
感谢老师分享
作者: 自行车    时间: 2018-10-31 22:01

作者: 叮叮    时间: 2018-10-31 23:41

作者: 铃兰    时间: 2018-11-1 23:08

作者: 铃兰    时间: 2018-11-1 23:15

作者: xiaocao    时间: 2018-11-2 21:08
感谢老师分享!
作者: 郭艳辉    时间: 2018-11-5 11:44
感谢老师分享
作者: 方增慧    时间: 2018-11-22 08:14
新亚甲蓝染色方法是怎样的,每次染完都很浅,不好看
作者: Destiny丶飘血    时间: 2018-11-23 16:41
我想问两个问题
1.血涂片大家都用老师讲的这种推片法吗?但书上说这种方法不太适用于小动物。
2.要不要用抗凝剂(EDTA、枸橼酸纳)?
作者: 张伟伟    时间: 2018-11-26 18:57
方增慧 发表于 2018-11-22 08:14
新亚甲蓝染色方法是怎样的,每次染完都很浅,不好看

说明书上是让一滴血加一滴染液静置20分钟,可以尝试多加一滴染液,放置时间延迟一些效果会好一些
作者: 悠然啊    时间: 2018-12-10 03:25

作者: 糖加牧童    时间: 2018-12-25 13:02
学习,谢谢老师的分享   
作者: VETxu    时间: 2019-2-12 10:37
每天学习一点点
作者: yalicheng179    时间: 2019-2-12 23:33

作者: hshs    时间: 2019-2-20 13:22

作者: 306588862    时间: 2019-2-24 17:20

谢谢张老师的无私分享
作者: xiaocao    时间: 2019-4-19 15:52
老师,网织红细胞怎么去计算?如何判断再生与非再生性贫血?
作者: 孙行者    时间: 2019-4-24 00:58
求亚甲蓝的染色具体操作方法
作者: hshs    时间: 2019-4-27 09:47

作者: yalicheng179    时间: 2019-4-28 08:35
感谢分享
作者: 燕麦不加糖    时间: 2019-5-18 17:30
谢谢老师
作者: zhangenzyme    时间: 2019-5-24 15:52
谢谢老师分享!
作者: fex8973737wj    时间: 2019-5-25 09:55
非常棒的资料谢谢老师了
作者: xxx    时间: 2019-6-11 10:46
老师网织红细胞怎么计数判读啊
作者: 燕麦不加糖    时间: 2019-6-12 07:40
谢谢老师
作者: 笨笨    时间: 2019-6-15 22:47

作者: 张新年    时间: 2019-6-17 08:04

作者: 梦回千年    时间: 2019-7-2 12:12

作者: 廊坊永鑫罗玄    时间: 2019-7-13 13:28
谢谢分享
作者: 吴欣丽    时间: 2019-7-17 14:06
谢谢老师无私分享
作者: xiaocao    时间: 2020-12-22 11:36
老师,那如何计算网织细胞呢?




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