宠医帮
标题: 样本采集与制作——翻译和疑问 [打印本页]
作者: 小柿子 时间: 2016-9-17 03:15
标题: 样本采集与制作——翻译和疑问
看完 Diganostic Cytology and Hematology of The Dog and Cat 第一章讲最基础的采样和制片后，感触太深，回想先前我们采样还有制片真的是太太任性了，怪不得什么都是模糊，分不清细胞核细胞质，先前最苦恼的是觉得都一个颜色，分不清紫色蓝色粉色。当天便仔细认真的做了一个胸腔积液推片，玻片不同部位显微镜图片对比下，真的差别好大，一张太厚模糊，一张很清楚。之后我便花了很多时间把第一章翻译出来，和大家分享，有于水平有限，可能有很多错误地方，希望大家指出讨论下:loveliness:
-
图片1.png
(506.18 KB, 下载次数: 668)
-
图片2.png
(1.1 MB, 下载次数: 614)
-
图片3.png
(856.36 KB, 下载次数: 639)
作者: 小柿子 时间: 2016-9-17 03:18
第一章 样本采集和制作
对样本进行细胞学检查已经成为诊断各种组织病变的一种非常可靠有效的方法。细胞学检查和组织病理学检查两者互补，细胞学检查是对采样部位的侵入程度较低并且检查时间较短，而组织病理学检查可以获得更多关于组织结构的的信息。然而，随着先进成像技术的普及，通过组织病理学来评估内脏的病变也得到更多的应用，以前由于这些部位难以取样而不可行。临床医生越来越多地采用这种诊断方式，细胞病理学家对各种各样的病变和组织样本的辨别也越来越有经验，因此现在该技术可以诊断的疾病范围和诊断的准确性也有了很大提高。
除了细胞病理学家的经验，对细胞学诊断质量起关键作用的一个重要因素是样本质量。如果临床医生在制作细胞学样本方面有丰富经验，那么他/她便能在细胞学检查时获得更多信息。对于组织样本，一旦样本收集完成并且泡在适当浓度的福尔马林中，剩下的样本制作便交由化验员完成。在做细胞学检查时，临床医生不仅要采集足够的具有代表性的样本，还要准备好送检的玻片，通常还需要染色。由于在采样和玻片制作时样本通常都是几乎看不见的，因此在采样过程中确定是否采集到足够的样本是非常困难的。
掌握细胞学样本的采集和制作技术，需要依靠大量的经验以及不断地在结果基础上改进。许多临床医生（以及主人）在得知送检样本不具有诊断价值时会感到非常沮丧，这是完全可以理解的。令人欣慰的是，如果对样本采集的基本原则和一些常见误区加以了解，便可以很大增加诊断成功的几率。
采集样本的方法
细胞学检查有多种样本采集方法，适用对象见表1-1。
采样方法 | | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | 针对表皮病变（例如癣菌病），应刮得足够深直至出血或血清帮助细胞粘在玻片上，这点非常重要 |
| | |
| | |
| | |
| | |
作者: 小柿子 时间: 2016-9-17 03:36
细针穿刺活检
细针穿刺活检（FNB）使用一个标准的针筒和针头，有抽吸和不抽吸两种方法（见后面描述）。对于皮肤肿块或者增生病变，这是最好的一种采样方法。FNB直接从病变组织内部采集细胞，可以避免炎性细胞和微生物带来的外部污染，这在压片，棉签取样和刮片时经常遇到。外部细胞通常保存得不好，失去原有形态，并很可能因暴露于继发的炎症反应而呈现一些细胞老化的相关伪象，在有溃疡肿块时尤其明显。这些改变会对细胞异型性的重要性评估带来很大干扰。一个典型的例子是膀胱肿块，采用创伤性导尿管穿刺方法得到的样本里面经常会含有大量的细胞表现出明显的退行性和由于老化以及长时间暴露于尿液而带来的伪象（图1-1）。相反地，通过FNB采集的病变内部样本却保存地非常好，也容易判读（图1-1，A）。针对皮下或者内脏肿块，FNB也是唯一一种可行的采样技术。
针筒和针头的选择：FNB选用22-25 G的针头和3-20ml的针筒。组织越柔软，选用的针头和针筒应越小。即使对很硬的组织，也很少有必要选择大于22G的针头来抽吸。如果选用大于22G的针头，组织芯会很容易被吸出，导致自由细胞的采集量便会大大减少。并且，过大的针头会更多的血液污染。
针筒应根据抽吸部位组织的密度来选择。软组织，例如淋巴结，可以使用3ml的针筒来抽吸。硬组织，例如纤维瘤和鳞状细胞癌，则需要更大的针筒才能产生足够的吸力来收集足够的细胞。如果不知道组织的密度，可以选用12ml的针筒。当采用非抽吸法收集样本时，针筒的选择没有严格要求。
抽吸部位的准备：如果要在采样部位进行微生物测定，或者要进行空腔穿刺（腹腔、胸腔、关节等），那么抽吸部位要进行外科准备。另外其他情况则本质上要求像疫苗注射或静脉穿刺那样进行备皮。可以使用棉签醮酒精消毒采样部位。如果利用超声波指导采样，非常重要的一点是不使用耦合剂而使用酒精代替。普通的细胞染料就会把耦合剂染成粉红。即使是细针穿刺皮肤时沾到的一点点耦合剂就足以完全模糊细胞，使得整个玻片不具有诊断价值。
抽吸步骤：FNB的标准抽吸方法，一只手固定好肿块，另一只手拿着带针头的针筒，将针头插入肿块的中心部位（图1-2）。快速将活塞拉至针筒的3/4位置，产生强大吸力（图1-3）。如果肿块足够大，患宠也被很好地保定，在针尖来回重复穿插肿块并深入到肿块的2/3时，可以一直保持吸力状态。如果是大肿块，针尖停留在肿块内部同时可以插向不同方向来采集到足够多的样本。在拔出针头时需要注意针筒内不能有吸力，如果还有吸力的话，会导致样本进入针筒内（无法打出来），或者针头会被肿块表面组织污染。
在任一个采样点，吸力都不可以超过几秒钟。通常，即使是已经采集到足够的样本，在针筒或者针尖都看不到任何物质。如果吸力过大，或者吸力维持时间过长，最终会引起血管破裂，导致样本被周边血液污染而不具有诊断价值。
针头多处采样完成后，释放吸力，然后从肿块内拔出针头。针筒从针头上拔下，然后吸入空气，再把针头插上，接着快速推动活塞将针头内的样本推出至显微镜玻片的一端。如果可以的话，应该多制作几个玻片样本（见后面玻片准备部分）。
不抽吸法（毛细管法，穿刺法）：许多人在用FNB采集样本时喜欢用不抽吸法，这种方法可以获得比标准FNB抽吸法一样好或者更好的样本。不抽吸法非常适用于大多数的肿块，尤其是血管分布过多的肿块。这种方法类似FNB标准方法，只是在采样时不施加吸力，采用较细的针头和5-12ml的针筒。针筒在采样前预先吸入一部分空气，方便快速将样本注入到玻片上。用大拇指和食指捏着针筒靠近针头接口或者针头接口的位置（像捏着飞镖一样），以便可以最好的控制针头（图1-4）。
另一只手固定住需要采样的肿块，将针头插入肿块。针头在肿块内快速来回穿刺，就像缝纫机一样。这样通过穿刺和组织压力便可以采集到细胞。必须注意针头不可以拔出肿块，防止被周围组织污染。然后拔出针头，快速将样本推出至干净的玻片上，用本章后面介绍的制片方法制作玻片（见“玻片制作”）。针筒预先吸入空气，便可以快速将样本推出到玻片上，避免样本干燥凝固。
有些人在使用不抽吸法时喜欢用没有插针筒的针头。尽管在采样后还是得插上针筒来将样本打出，这种方法可以更好地掌控针头。
如果可以的话，最好是利用不同的采样方法在肿块内不同部位采样，增加取得具有诊断价值的样本的概率，确保取得的样本具有代表性。
图1-1移行细胞癌样本的显微镜图片。A，采用细针穿刺活检法在肿块中收集的样本，其中细胞保存完好可以检查细胞核以及细胞质的细节。B，采用创伤性导尿管穿刺法收集的样本。这些样本含有的大多数细胞都是由于老化以及暴露于尿液而有明显改变的表层细胞。细胞核都呈现淡粉紫色，细胞核内部被无数空白空间分隔开，表明细胞核出现退行性变化。（Courtesy Oklahoma State University课件）
图1-2 细针穿刺活检抽吸法。一只手固定住肿块，同时将针头插入肿块中心。拿着针筒的那只手向外拔活塞产生吸力。
图1-3 硬肿块细针抽吸法。针头插入肿块后（A），快速拔活塞在针筒内部产生吸力（B），通常拔至针筒的一半或3/4处。在允许针尖不拔出肿块的情况下，将针头向不同方向穿刺，同时保持针筒内的吸力。在针头离开肿块之前，松开活塞，释放针筒内的吸力。
图1-4 FNB不抽吸法。用大拇指和食指捏着针筒靠近针头接口或者针头接口的位置。注意针筒预先吸入空气。另一只手固定住肿块。这种方法可以更好地掌握针头。（Courtesy Oklahoma State University课件）
-
图片4.png
(106.14 KB, 下载次数: 377)
-
QQ截图20160917033133.png
(156.61 KB, 下载次数: 349)
-
QQ截图20160917033511.png
(58.07 KB, 下载次数: 362)
-
图片6.png
(91.81 KB, 下载次数: 378)
作者: 小柿子 时间: 2016-9-17 03:46
本帖最后由 小柿子 于 2016-9-17 16:19 编辑
采样小贴士
制作提交多个玻片：这是获得更多具有诊断价值信息的最重要事情之一。细胞学采样使用小号针头，整个过程通常相比较来说无痛的。当宠物一就诊时，就多处采样并制作多个玻片，这花不了多少时间，而当你发现样本无诊断价值想重新采样时，这时宠物经常已经离开医院了。尤其是当采样需要镇定或者麻醉时，这一点尤为重要。最好在患宠仍在医院时先将一两个玻片染色并粗略地检查样本是否有足够的细胞（如果镇定或麻醉宠物的话，在宠物苏醒之前）。如果玻片细胞含量不足，可以马上重新采样。
任何一个玻片都有无数不具诊断价值的原因。玻片可能由于针头在采样时没有插入病变部位（位置错误）（图1-5）或者插入病变没有代表性的部位（例如肿瘤的发炎或坏死部位）（图1-6）。除此之外，有些病变只是简单的不大量的脱落细胞。即使是采集到足够的细胞，特别多的情况是，细胞没有很好地展开，样本太厚了而不可诊断（尤其是在淋巴结吸出物常见），或者是在压片过程中所有细胞破裂了（图1-7）即使是对一个采样非常有经验的临床医生来说，单一病变多次采样制片检查并且除了一个玻片其他所有玻片都由于这个那个原因不具诊断价值，这也是很常见的。
可以的话，对于任一个病变应在不同部位采集并制作至少4-5个玻片，如果玻片上样本过厚或者几乎没有，那么应该制作更多样本。样本越多，其中一个具有诊断价值的机率越高。
如果许多肿块需要采样，那么每一个肿块需要使用新的针头和针筒。如果重复使用的话，上一次采样遗留在针尖内的细胞会污染下一次采样。每一个玻片应标注好采样部位。
如果许多肿块需要采样，那么每一个肿块需要使用新的针头和针筒。如果重复使用的话，上一次采样遗留在针尖内的细胞会污染下一次采样。每一个玻片应标注好采样部位。
避免血液污染：血液污染（血液稀释）是另一个常见导致玻片无诊断价值的原因。FNB抽吸法会采集阻力最小的组织。如果病变部位血管破裂，阻力最小的组织便是外周血管。一旦出现严重的血液污染，想要挽救样本就非常困难,应该用新的针头针筒重新采集样本。
造成血液污染的两个最主要原因是针头太大（<22G）和抽吸时间过长。大孔径针头并不会采集到更多细胞，却经常会损伤细小的血管。就像前面说到的，即使针头里已经采集到足够多的细胞，但是针筒里却看不到什么东西。只要针头针筒连接处能看见东西，就应立即停止采样，马上制作玻片。
有些并表部位血管密集，即使采样技术非常好，也很难避免血液污染。在这种情况下，采用不抽吸可能会减少血液污染，并且采集到更多的组织细胞供判读。
不要胆怯：其他样本细胞含量少的原因是吸力不够大（抽吸法）和针头穿刺速度和力度不够（不抽吸法）。当采用不抽吸法时，临床医生是利用针头在组织里的穿刺动作来产生细胞和组织液，它们再通过毛细管作用进入针头。针头穿刺应该快速并足够深入（尽管肿块的大小会限制刺入深度）。
后面继续.....
-
QQ截图20160917034625.png
(61.93 KB, 下载次数: 358)
-
QQ截图20160917034750.png
(261.77 KB, 下载次数: 354)
-
QQ截图20160917034825.png
(279.97 KB, 下载次数: 352)
作者: 王帆 时间: 2016-9-17 07:03
你是活雷锋么？;P;P;P;P
作者: zx0315 时间: 2016-9-17 07:51
谢谢分享，真的厉害:D:D
作者: 佘源武 时间: 2016-9-17 08:06
厉害:hug::hug::hug::hug:
作者: 刘欣 时间: 2016-9-17 08:25
活雷锋，鉴定完毕
作者: 韩兽 时间: 2016-9-17 09:34
太谢谢了，对细胞学血液学很感兴趣，无奈英语太差了～～
作者: 363305633 时间: 2016-9-17 09:51
我觉得宠医帮你能把这本书翻译出来
作者: 小柿子 时间: 2016-9-17 16:22
压片采样
压片法可以应用于溃疡或者表面有渗出的病变（图1-8）或者是外科手术以及尸检获得的组织样本（图1-9）。即使炎症是继发的，外表病变压片也通常只能看到炎性细胞，肿瘤细胞不会脱落到渗出物中或者溃疡肿块的压片中。如果可以的话，除了压片外，还应该对溃疡或渗出部位下面组织进行FNB采样。在未溃疡部位插针采样可以减少污染。渗出或溃疡压片最大的好处是可以鉴别细菌或者真菌是否存在。但是请记住细菌有可能只代表继发细菌感染。
溃疡部位压片应在清理之前，压片之后应使用盐水泡过的医用海绵清理病变。
对手术或尸检组织压片采样时，第一步应先切开组织获得一个新鲜切面（图1-9）。然后，用一个干净的吸水材料把切面上的血液和组织液吸收干净（图1-10）。过多的血液和组织液会阻止组织细胞附着在玻片上，造成采集细胞过少。而且，过多的组织液会妨碍细胞在玻片上自然干燥时展开成其正常大小和形态。当病变表面过多的血液和组织液被吸收掉之后，在干净玻片中间按压病变表面然后直接向上拿起（图1-11）。重复上面步骤几次，在玻片上获得多个压印。如果过多的血液被充分吸掉，组织就会粘住玻片，看起来像脱了一层皮在玻片上。正确方式制作的玻片上在按压位置会有轻微不透明区域，但是不应该有血液堆积区域（图1-12）。
不需要涂抹，不要在玻片上滑动组织，这样会造成细胞破裂。可以话，应该多制作几个玻片，可以保留少数几个以防需要特殊染色。制作了足够压片之后，组织应该泡在适当比例的福尔马林里，如果需要的话，这样可以送检做组织病理检查。
-
搜狗截图20160917162032.png
(165.99 KB, 下载次数: 209)
-
搜狗截图20160917162052.png
(208.52 KB, 下载次数: 213)
-
搜狗截图20160917162121.png
(206.78 KB, 下载次数: 189)
-
搜狗截图20160917162136.png
(196.28 KB, 下载次数: 204)
-
搜狗截图20160917162148.png
(239.08 KB, 下载次数: 199)
作者: 小柿子 时间: 2016-9-17 16:25
本帖最后由 小柿子 于 2016-9-17 16:27 编辑
刮片
刮片可以应用于外部病变和手术或者尸检获得的组织。一般说来，刮片比压片能得到更多的细胞，但是，和压片一样，如果在溃疡表面刮片，得到的大多数是表面污染物和炎性细胞。总的来说，在诊断肿瘤时，刮片没有FNB有价值。刮片更适用于干燥平整的表皮病变（这些病变不适合FNB或者压片）以及来自手术或者尸检的组织（图1-13）。两个适合刮片的例子是猫嗜酸性肉芽肿病变和皮肤廯菌病。刮片时刀片垂直于病变并向一个方向重复刮几次。当刮干燥不溃疡例如皮肤廯菌那样的病变时，应刮得足够深，直至有血清或者血液渗出。这些蛋白质和纤维含量丰富的液体会帮组将细胞（刮皮肤廯菌时的毛发）固定在玻片上，并防止他们在染色时被冲走。将采集到的样本转移到玻片上，可以用刀片轻轻地涂抹在玻片上，也可以用后面介绍的一种制片方法。
-
搜狗截图20160917162436.png
(222.62 KB, 下载次数: 217)
作者: 小柿子 时间: 2016-9-17 16:26
棉签取样
总的来说，通常在其他采样方法都不适用时才使用棉签取样，例如阴道，外耳，或者瘘管采样时。外耳道和瘘管用棉签采样时非常容易找到感染病原。取样时使用灭菌棉签，如果病变潮湿，不需要湿润棉签；然而，如果病变不是很湿，建议用生理盐水先浸湿棉签。湿棉签可以帮助减少在采样以及制片时一些细胞的干扰。采样时应避免使用润滑凝胶（例如KY胶），因为胶会包裹住样本，使细胞无法染色，制作的玻片也无法判读。采样结束后，应立即轻轻地在干净玻片上滚动棉签。很重要的是棉签不要在玻片上擦来擦去，这样会导致细胞破裂（图1-14）。
-
搜狗截图20160917162645.png
(202.78 KB, 下载次数: 213)
作者: 小柿子 时间: 2016-9-17 16:31
玻片制作：硬组织抽吸玻片盖玻片抹片法（压片制片法） 当使用正确时，这一般是FNB或者硬组织刮片的最佳制片法。制片目的是制作薄薄的一层细胞，细胞也完全展开，而且没有破裂。FNB采集到的样本推出在干净玻片（样片）的一端（1.3cm左右）。另一个玻片（展片）垂直盖在样片上的样本上方（图1-15）。由于展片本身的重力作用，样本通常会自行下两个玻片中间平展开来。如果样本过厚或者有颗粒，无法平展，那么在展片上施加一个短暂的轻微的向下压力后立即释放压力。然后轻轻地将展片沿着下面样片长度地方向拉动，将样本展开（图1-16）。尽管名字叫压片制片，但是很重要的是在涂片时不要在展片上施加向下压力，因为这会导致大多数细胞破裂。
如果操作正确，抹片后的样本类似“火焰”形状，而且没有延伸到玻片的边缘。这点非常重要，就像血涂片一样，通常是在样本边缘细胞才会充分展开易于判读。抹片如果超出玻片边缘就表明样本太厚而无法判读。并且，许多自动染色机不会将整个玻片染色，而是会在玻片两端留0.6-1.3cm左右的宽度不染色。这些部位的细胞不会被染色，因此无法判读。即使用浸泡染色法将整个玻片全部染色，在一些显微镜上也很可能看不到边缘的样本。
当操作正确时，即使是细胞团，这个方法可以很好地展开细胞，因此细胞细节也可以看得很清楚易于判读。这种方法的主要缺点是，尤其是新手容易出现，过多细胞破裂。淋巴细胞特别脆弱，在制片时即使施加中等压力也非常容易破裂。
-
搜狗截图20160917162836.png
(202.39 KB, 下载次数: 227)
-
搜狗截图20160917163023.png
(66.83 KB, 下载次数: 217)
作者: 小柿子 时间: 2016-9-17 16:38
血涂片法
很多样本，尤其是淋巴结抽吸物，从针筒推出至玻片上时有足够的组织液、血液或者两者都有，那么可以像制作血涂片一样将样本涂匀展开（图1-17）。尤其时对易破细胞来说，这种方法可以减少细胞破裂，而且一般会制作出薄薄的一层平展开并且完整的细胞。
和玻片盖玻片法一样，用针筒将样本推出至样片的一端。样片长度的一端放在样本上的样本前面。展片与样片成45度角，并向后移向抽吸物，直至进入抽吸物的1/3处。然后展片快速平滑地向前滑动，就像做血涂片一样。抹片应在距样片另一端大约1.3cm处呈羽毛状结束。如果样本一路抹到玻片边缘，那么应该重新制作玻片，并且将更少的样本转移到玻片上。
-
搜狗截图20160917163802.png
(80.82 KB, 下载次数: 192)
作者: 小柿子 时间: 2016-9-17 16:42
“海星”制片法
有些人采用另一种方法铺开抽吸物，就是用针尖将抽吸物沿着不同方向在玻片上拉动，制造一个海星形状（图1-18和图1-19）。这种方法不怎么容易损坏易破细胞，但是在细胞周围会残留厚厚的组织液。经常遇到的情况是，厚厚的组织液会阻止细胞完全展开妨碍观看细胞细节。通常会有一些可以接受的样本区域，但是，更偏向用玻片盖玻片法或者血涂片法制作一个高质量的玻片。
-
搜狗截图20160917164143.png
(38.31 KB, 下载次数: 222)
-
搜狗截图20160917164212.png
(177.63 KB, 下载次数: 200)
作者: 小柿子 时间: 2016-9-17 16:45
制片小贴士
不要让样本干燥或者凝固：如果在制片之前样本已经凝固或者干燥，细胞很可能不能充分展开且难以判读。而且，细胞经常会被扭曲，或者由于相互凝固在一起无法染好。在采用之前应将几个干净玻片放在容易拿到的位置，缩短采样和制片间隔时间。
一个经常会犯的错误是将针头里的样本远距离喷洒在玻片上。这会导致在玻片上形成许多滴样本，非常像散弹发射（图1-20），带来的问题是这些小点在操作者还没来得及制片时就已经干燥了。当在显微镜下观看时，会发现一团团没有平展开来的细胞，难以看清细胞形态。当将样本移至玻片上时，针头边缘应尽可能近的靠近玻片，推出样本呈一滴。然后应立即用前面介绍的一种制片方法制作玻片。如果采集到足够多的样本，滴在多个玻片上，应在样本干燥之前快速将所有玻片制作完成。如果使用不抽吸法时，针筒预先吸入空气可以减少采样和制片时间，并且制片之前样本凝固的可能性。
避免制作厚抹样：制片抹样太厚的话，细胞无法完全展开，影响判读。被过多血液污染的样本，或者从易脱落大量细胞的组织中采集的样本（例如淋巴结抽吸物），常导致抹样过厚。理想情况是只滴一小滴样本到玻片上（大约制作血涂片所需的血量）。如果滴过多的样本到一个玻片上，那么抹样通常会很厚。如果样本一直可以滑到玻片边缘，抹样也很可能会过厚。
一般来说，用针筒推出到玻片上的样本量是可以控制的。但是如果太多样本滴到玻片上，利用血涂片法仍然可以得到很薄的抹样。展片向后滑动至刚刚触及样本，样本便会由于毛细管作用在展片上铺开，然后快速向前抹片。另一种方法是，像玻片盖玻片法一样将展片平放在样本上，然后拿起展片并放在另一个干净的玻片上，在它上面制作一个抹样。如果需要的话，这种方法可以重复多次，最终初始样片上的样本也已经被涂抹开来。利用这种方法可以从一大滴样本中获得多个薄薄的抹样。
-
搜狗截图20160917164336.png
(163.08 KB, 下载次数: 197)
-
搜狗截图20160917164354.png
(389.35 KB, 下载次数: 213)
作者: admin 时间: 2016-9-17 18:49
这么积极主动地与他人分享自己的翻译成果，这时我的脑海里只出现了四个字“功德无量”，同时这四个字也献给宠医帮的所有专家！
楼主的行为对我们是极大的鼓励和支持，也是对宠医帮“开放、专业和便捷”这一理念最好的诠释。
再次感谢，希望今后能不断地看到楼主的文章。
作者: 胡璠 时间: 2016-9-17 19:11
:hug::hug::hug::hug::hug::hug::hug:太激动了:kiss::kiss::kiss::kiss::kiss::kiss:
作者: qdr163 时间: 2016-9-17 19:13
:handshake:handshake:handshake:handshake:handshake:handshake:handshake:handshake:handshake:handshake:handshake:handshake:handshake:handshake
作者: xiaoyi 时间: 2016-9-17 19:58
简直是偶像，太厉害了，谢谢分享
作者: 兽医陈满福 时间: 2016-9-17 21:56
谢谢谢谢:kiss::kiss::kiss::kiss:
作者: 亦无說有 时间: 2016-9-17 23:44
对于我这种英语学渣来说，楼主就是雷锋，活雷锋！！！:handshake:handshake:handshake:handshake
作者: 王帆 时间: 2016-9-17 23:47
都快来继续夸他！我看很快他就能把整书翻译出来了:lol！
作者: 淡化 时间: 2016-9-18 00:22
谢谢分享！更多期待……
作者: 刘欣 时间: 2016-9-18 07:35
赞美不能停
作者: 宠贝贝宠物诊所 时间: 2016-9-18 08:43
除了谢谢，都无法再用语言来表达
作者: 景少伟 时间: 2016-9-18 10:18
牛，谢谢，不过这些汉子我还得好好读读，一遍也看不懂
作者: liuying 时间: 2016-9-18 10:28
太厉害了！
作者: 葛创 时间: 2016-9-18 12:31
刘欣 发表于 2016-9-17 08:25
活雷锋，鉴定完毕
刘老师，我们医院的，多给点金币呀:P
作者: 刘欣 时间: 2016-9-18 12:57
葛创 发表于 2016-9-18 12:31
刘老师，我们医院的，多给点金币呀
估计能给个钻石
作者: xiaocao 时间: 2016-9-18 14:23
谢谢分享！:handshake太给力了！
作者: 小青蛙 时间: 2016-9-18 14:25
英语八级的大神，66666！:lol
作者: 爱哭的小木偶 时间: 2016-9-18 20:38
有用。谢谢辛苦码字分享。
作者: 翟羽佳 时间: 2016-9-18 22:20
雷锋同志，太牛了O(∩_∩)O:victory:
作者: lyang_006 时间: 2016-9-18 22:57
太牛了，谢谢分享
作者: Mr.Chen 时间: 2016-9-19 00:23
谢谢分享！非常感谢！
作者: 游少宝 时间: 2016-9-19 00:38
太棒了，感谢分享
作者: 唐宛如 时间: 2016-9-19 03:22
太厉害了！！！膜拜脸！
作者: 葡萄小丸子 时间: 2016-9-19 08:15
真的非常非常感谢:victory::victory::victory:
作者: 赵凯 时间: 2016-9-19 10:07
谢谢，赞赞:hug::hug::hug::hug::hug::hug:
作者: zmchao 时间: 2016-9-19 11:06
活雷锋，谢谢:loveliness::loveliness::loveliness::loveliness:
作者: 抬头向前看 时间: 2016-9-19 18:03
谢谢楼主，楼主雷锋:loveliness::loveliness:
作者: 萌萌 时间: 2016-9-20 00:19
谢谢分享，学习了。。
作者: 只羽千影 时间: 2016-9-21 11:10
雷锋啊，谢谢:lol:lol:lol
作者: Rcok 时间: 2016-9-21 11:18
作者: 徐丽丽 时间: 2016-9-23 09:02
活雷锋！！！谢谢分享。膜拜中。。。。。。。
作者: 王鑫 时间: 2016-9-23 13:05
来学习的小兽医。。。。
作者: 黄胜宇 时间: 2016-9-25 13:09
谢谢分享～
作者: 郭迎春 时间: 2016-9-25 23:39
赞美，赞美
作者: 李成根-liarica 时间: 2016-9-26 14:06
我要不要买本英文版，对照这翻译无障碍阅读;P真是像我这样英语不好的雷锋啊
作者: sly 时间: 2016-9-27 08:34
厉害了，厉害了。感谢楼主。。
作者: liudong 时间: 2016-9-29 08:43
谢谢分享！！！！:loveliness::loveliness::loveliness::loveliness::loveliness::loveliness:
作者: HGK 时间: 2016-10-8 19:27
顶礼膜拜啊！大神
作者: 土豆 时间: 2016-10-10 01:03
学习了，好人呐
作者: siping宝康 时间: 2016-10-20 08:10
非常感谢楼主精彩的分享！
作者: siping宝康 时间: 2016-10-20 08:10
学习知识的好机会！！！
作者: A宠静 时间: 2016-10-23 19:27
感谢分享:loveliness:
作者: 胡鹏飞 时间: 2016-11-3 08:41
果断收藏 太感谢
作者: 唐芳婷 时间: 2017-6-20 13:10
作者: 猫叫兽 时间: 2017-6-20 13:14
我居然才看到，必须赞啊！！！
作者: 黄精庭 时间: 2017-8-11 18:10
厉害呀，确实大神，厉害
作者: 金桥 时间: 2017-10-30 18:03
厉害了楼主，功德无量
作者: 李慧晓 时间: 2017-11-1 19:59
活雷锋，你就是我们的活雷锋！！
作者: 13050044656 时间: 2017-12-21 12:53
无私的精神值得学习
作者: sophiegreen 时间: 2018-1-7 09:40
楼主辛苦~ 感谢分享~~~
作者: ctao10000 时间: 2018-1-24 17:01
牛，感谢分享，向楼主学习
作者: 谢尔顿 时间: 2018-5-1 11:50
作者: 叮叮 时间: 2018-5-27 14:07
就连中文都要读一阵子呢！大赞
| 欢迎光临 宠医帮 (https://www.vetgroup.cn/) |
Powered by Discuz! X3.2 |
